Aggiornamento delle competenze diagnostiche in citofluorimetria e biologia molecolare per la caratterizzazione biologica di epn, LMC e MPN ph-

Le neoplasie mieloproliferative rappresentano un gruppo eterogeneo di patologie clonali della cellula staminale ematopoietica caratterizzate da proliferazione delle linee mieloidi e da specifiche alterazioni molecolari che ne determinano la patogenesi, il decorso clinico e la risposta ai trattamenti.

Le più recenti classificazioni internazionali dell'Organizzazione Mondiale della Sanità (WHO) e dell'International Consensus Classification distinguono in modo netto le forme BCR::ABL1 positive, rappresentate principalmente dalla leucemia mieloide cronica (LMC), dalle neoplasie mieloproliferative Ph-negative, che comprendono Policitemia Vera, Trombocitemia Essenziale e Mielofibrosi Primaria.

Negli ultimi anni la diagnostica ematologica ha subito una significativa evoluzione grazie all'introduzione di tecnologie molecolari ad elevata sensibilità che hanno progressivamente modificato il ruolo del laboratorio nel percorso diagnostico e nel monitoraggio delle malattie mieloproliferative. Nel caso della LMC, la quantificazione del trascritto BCR::ABL1 mediante Real Time PCR quantitativa rappresenta lo standard internazionale per il monitoraggio della risposta molecolare alla terapia. La valutazione seriale dei livelli di trascritto consente infatti di definire la profondità della risposta molecolare e di identificare precocemente eventuali segnali di perdita di risposta.

In una quota di pazienti con risposta subottimale o con perdita della risposta molecolare possono emergere mutazioni del dominio tirosin-chinasico di ABL1, responsabili di meccanismi di resistenza terapeutica. Tra queste, la mutazione T315I riveste un ruolo particolarmente rilevante dal punto di vista clinico e la sua identificazione mediante metodiche molecolari sensibili rappresenta un passaggio diagnostico fondamentale nel percorso di gestione della malattia.

Parallelamente, nelle Neoplasie Mieloproliferative Ph-negative, la diagnostica molecolare si basa sull'identificazione delle principali mutazioni driver coinvolte nell'attivazione costitutiva della via di segnalazione JAK-STAT. In particolare, la ricerca delle mutazioni JAK2 V617F, CALR e MPL costituisce oggi un elemento centrale nel processo diagnostico e nella definizione biologica della malattia.

L'introduzione delle tecnologie di Next Generation Sequencing (NGS) ha ulteriormente ampliato le possibilità di caratterizzazione molecolare delle MPN. Un ulteriore ambito diagnostico di rilevante interesse è rappresentato dall'emoglobinuria parossistica notturna (EPN), rara patologia clonale determinata da mutazioni del gene PIGA, la cui identificazione si basa su metodiche di citometria a flusso ad elevata sensibilità. Alla luce di questi sviluppi, appare fondamentale promuovere percorsi strutturati di formazione sul campo, finalizzati al consolidamento delle competenze tecniche del personale di laboratorio e all'aggiornamento delle metodiche diagnostiche utilizzate nella pratica clinica.